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中药健脾益肺方对EAAT2表达的影响 - 实验动物

中药健脾益肺方对EAAT2表达的影响 - 实验动物

目的:探索健脾益肺方(JPYF)对谷氨酸转运体2(EAAT2)表达的影响及可能机制方法:取新生24h内的SD幼鼠,无菌条件下取出幼鼠大脑皮层星形胶质细胞,分离提纯原代培养以进行后期实验;调整适宜的细胞浓度分5组种板,分别为A:谷氨酸组(250moL/L),B-D:JPYF方(/kg)+谷氨酸组,E:正常组,以JPYF方(终浓度为/kg)作用B-D组24h后,谷氨酸250moL/L作用A-D组4h诱导建立体外培养原代星形胶质细胞损伤模型;采用噻唑蓝(MTT)法测定各组星形胶质细胞存活率,紫外比色法检测培养基上清谷氨酸浓度,细胞免疫荧光法(immunofluorescence)Westernblot检测星形胶质细胞EAAT2的表达量,IF法检测原代脊髓神经元细胞存活情况结果:JPYF方可显著保护星形胶质细胞(),提高谷氨酸转运蛋白的表达(,),降低细胞外液谷氨酸浓度(,),减少神经元损害(,),在~1g/L的剂量上呈现一定的量效关系结论:JPYF方可减少谷氨酸对原代脊髓运动神经元细胞的损伤,其机制可能是JPYF方提高EAAT2的表达,降低细胞外液谷氨酸浓度,从而起到保护神经元的作用。

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